8 800 333 73 24БЕСПЛАТНО ПО РОССИИ

Основные требования к окраске гемоцитологических препаратов


  Ведущий специалист по биохимии и гематологии
ООО НПФ "АБРИС+"
Дуко Марина Мечиславовна

Важным аспектом гемоцитологического обследования является внимательное и полное изучение клеточной морфологии. Почти каждое заболевание, поражающее клетки крови, может быть визуализировано либо в форме цитологических изменений морфологии клеток, либо сдвигами распределения разных типов клеток. Несмотря на важность этого исследования, неправильное приготовление препаратов остается основным источником погрешностей во многих лабораториях.

При непунктуальном соблюдении в работе всех необходимых условий окраска часто получается неудачная, а иногда и совершенно непригодная даже для подсчета лейкоцитарной формулы. Поэтому необходимо остановиться на некоторых деталях и наиболее частых ошибках.

1. Правильная оценка морфологических особенностей возможна лишь на хорошо приготовленных и надлежащим образом окрашенных мазках. Для этого стекла должны быть не только хорошо отмыты, но и обезжирены. Для этих целей компания «Абрис+» предлагает смесь для обезжиривания «Униклин». В такой смеси происходит окончательное обезжиривание стекол, после чего стекла необходимо извлечь, просушить или протереть чистой, безворсистой тканью и хранить в чистом месте. В дальнейшем стекла извлекаются по мере надобности и, по возможности, не касаясь поверхности стекол.

2. Вода, в которой разводится краска, должна быть надлежащей кислотности. Для получения хорошо читаемых препаратов, для разведения и смывания красителей необходимо использование нейтральной либо забуференной (рН 6,8 – 7, 2) воды, либо приобрести готовую смесь сухих реагентов для приготовления забуференной воды производства «Абрис+» «Диахим-ГемиСтейн-Буфер-Г».

3. Сосуд (измерительный, цилиндр), в котором разводится краска, должен быть безусловно чист и совершенно свободен от кислот и щелочей; после работы вполне достаточно сполоснуть его дистиллированной водой и нет необходимости добиваться полного удаления следов краски, прибавляя щелочи, кислоты и т.д.

4. Фиксация мазков производится красителем-фиксатором «Диахим-ГемиСтейн-М-Г» по Май-Грюнвальду либо красителем-фиксатором «Диахим-ГемиСтейн-Л» типа Лейшмана; продолжительность фиксации –2-3 минуты. Необходимо помнить, что большинство неудач при последующем окрашивании мазков зависит от дефектов фиксирующей жидкости, а потому химическая чистота, полное отсутствие в реактиве воды, примесей всяких кислот, щелочей и т.д. является, безусловно, необходимой.

5. Каждый сорт краски требует различного разведения и времени для получения хорошей окраски мазка.
«Диахим-ГемиСтейн-Р»
Профессионал разводится буфером в соотношении 1:10-1:15, время окраски 10-15 мин.
«Диахим-ГемиСтейн-Р» Классик 1:20-1:45, время окраски 15-45 мин.
В связи с особенностями красителя и входящих в его состав прекурсоров, из-за мембранной проходимости краски не допускается разведение менее указанного, а тем более окрашивание чистым красителем.

6. Краска должна сохраняться в бутылке с хорошо притертой пробкой, и ее необходимо оберегать от всякого загрязнения. Если основной раствор стоит очень долго, то в нем увеличивается количество азура и он начинает перекрашивать препараты: ядра лейкоцитов получаются интенсивно темно-вишневого цвета, а зернистость нейтрофилов почти совсем не воспринимает окраску. В этих случаях необходимо делать более значительное разведение краски, а продолжительность окраски несколько сократить.

7. Краска должна быть тщательно смешана с буфером.

Чёткое соблюдение данных условий позволит получать хорошо окрашенные, пригодные для изучения морфологии клеток мазки крови, что является залогом успешной работы врачей-морфологов.

Возврат к списку




ВОПРОСЫ-ОТВЕТЫ

Вопрос:
Можно ли разводить краситель по Романовскому 1:5 ?

Подробнее

ВИДЕОМАТЕРИАЛЫ

Окраска мазков крови по Паппенгейму-Крюкову (вариация метода окраски по Романовскому):

ОТЗЫВЫ

Отзыв о наборе Цито-ПАП Окраска по Папаниколау:

Цитологическая лаборатория б-цы Петра Великого Университета Мечникова, г.Санкт-Петербург

Читать далее


НАШИ ПАРТНЕРЫ:

Войти в систему