Санкт-Петербург
8 800 333 73 24БЕСПЛАТНО ПО РОССИИ
Консультант раздела:
Цито-ПАП Окраска по Папаниколау
ДИАХИМ-АЛЬЦИАНОВЫЙ
Производитель «НПФ АБРИС+»
Состав набора: Реагент 1: карболовый фуксин Циля - 1 фл. Реагент 2: солянокислый спирт - 1 фл. Реагент 3: метиленовый синий - 1 фл.
Окраска кислотоустойчивых бактерий по Циль-Нильсену.
Принцип метода: основан на способности различных микроорганизмов оставаться окрашенными после воздействия спирто- и кислотосодержащими реагентами. Кислотоустойчивость обусловлена особенностями химического состава бактерий. Наиболее эффективны способы окраски по Циль-Нильсену для выявления спирто- и кислотоустойчивых бактерий, в частности семейства Mycobacteriaceae (микобактерий туберкулеза, лепры и др.) и некоторых простейших (криптоспоридий). Используемые при этом основной фуксин и метиленовый синий позволяют выявить, помимо бактериальной флоры, фуксинофильные внутриклеточные включения, характерные для некоторых вирусных, особенно респираторных, инфекций.
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ:
Предметное стекло перед исследованием должно быть тщательно вымыто и обезжирено смесью для обезжиривания предметных стекол.
Приготовление рабочего раствора солянокислого спирта (для кат.№ 441):
Содержимое флакона развести 96° этиловым спиртом в соотношении 1:9 (1 часть солянокислого спирта на 9 частей этилового спирта), перемешать.
Приготовление мазков:
Фиксация мазков:
Для фиксации мазков применяют метиловый спирт, ацетон, смесь Никифорова, жидкость Карнуа. Предметное стекло с высушенным мазком погружают в склянку с фиксирующим веществом на 10—15 минут и затем высушивают на воздухе, либо полученные мазки тщательно высушивают и затем фиксируют сухим жаром. Фиксация достигается посредством несильного нагревания (примерно до 70°С) предметного стекла, которое для этого трижды проводят в верхней трети пламени горелки (спиртовки) мазком вверх в течение 5 сек.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА:
1. Поместить на фиксированный мазок полоску фильтровальной бумаги; 2. Нанести несколько капель (3-4 капли) раствора фуксина (Реагент 1) так, чтобы он покрыл всю полоску фильтровальной бумаги; 3. Нагреть препарат над пламенем горелки до появления лёгкого облачка паров, не допуская закипания краски и подсыхания бумаги; 4. Охладить мазок до комнатной температуры; 5. Удалить фильтровальную бумагу; 6. Сполоснуть проточной водой в течение 30 секунд; 7.1. Дифференцировать Рабочим раствором солянокислого спирта до полного визуального обесцвечивания 1—3 минуты (для кат.№ 441); 7.2. Обесцветить мазок Реагентом 2 в течение 3-5 секунд до желтоватого оттенка мазка (для кат.№ 441С); 8. Смыть реагент проточной водой 10 секунд; 9.1. Поместить мазок в раствор метиленового синего (Реагент 3) на 1-2 минуты (для кат.№ 441); 9.2. Поместить мазок в раствор метиленового синего по Леффлеру (Реагент 3) на 1-2 минуты (для кат.№ 441С); 10. Промыть в проточной воде 1 минуту; 11. Высушить; 12. Микроскопировать с масляной иммерсией в световом микроскопе (окуляр х10, увеличение х100).
Результат окраски:
Микобактерии окрашиваются в красный цвет на общем голубом или синем фоне.
Морфологические характеристики кислотоустойчивых микобактерий при окраске по методу Циль-Нильсена:
Кислотоустойчивые микобактерий туберкулеза имеют в длину примерно 1 - 10 мкм, в ширину - 0,2 - 0,6 мкм. Обычно они видны в виде тонких изящных палочек, но иногда можно обнаружить изогнутые или извитые варианты.
Вопрос: Можно ли разводить краситель по Романовскому 1:5 ?
Авторы: Зенина М.Н. Ассистент кафедры КЛД СЗГМУ им.И.И.Мечникова Черныш Н.Ю. Доцент кафедры лабораторной медицины и генетики НМИЦ им.В.А.Алмазова
Отзыв о работе автомата окраски мазков крови "АвтоОМК", производства ЗАО "Солар", с использованием наборов красителей производства ООО НПФ "АБРИС+"
Логин
Пароль