КРЕАТИНКИНАЗА-МВ АБРИС+, IFCC, DGKC, иммуноингибирование

ПОДГОТОВКА КОМПОНЕНТОВ К АНАЛИЗУ

Монореагентный способ постановки

Приготовить Рабочий реагент, смешав Реагент 1 и Реагент 2 в соотношении 4 к 1. Рабочий реагент стабилен в течение 20 дней при температуре хранения 2-8°С в плотно закрытом флаконе в защищенном от света месте.

Биреагентный способ постановки

Реагенты 1 и 2 готовы к использованию.
Следует тщательно закрывать флаконы с Реагентами 1 и 2 непосредственно после каждого использования, в том числе при хранении на борту автоматических биохимических анализаторов (в нерабочее время).

ПРОЦЕДУРА АНАЛИЗА:
λ = 340 нм.
d = 1,0 (0,5) см.
Измерение против воздуха или воды.
Исследование проводить непосредственно в термостатируемой +37°С фотометрической кювете анализатора. Непосредственно перед использованием нагреть кювету и реагенты до температуры +37°С.

Стандартная процедура анализа

 
1. Монореагентный способ постановки - запуск реакции образцом.

Процедуру анализа провести в соответствии с Таблицей 1.
Таблица 1.

Внести в кювету:	Опытная проба	Калибровочная проба (в случае использования мультикалибратор)
Рабочий реагент, мкл	1000	1000
Исследуемый образец, мкл	40	---
Мультикалибратор (не входит в состав набора), мкл	---	40
Смешать и инкубировать при 37°С в течение 2 минут. Измерить оптическую плотность 3 раза с интервалом 1 мин. Вычислить среднее изменение оптической плотности за 1 мин (∆Е/мин).

2. Биреагентный способ постановки - запуск реакции субстратом
Процедуру анализа провести в соответствии с Таблицей 2.
Таблица 2.

Внести в кювету:	Опытная проба	Калибровочная проба (в случае использования мультикалибратор)
Реагент 1, мкл	800	1000
Исследуемый образец, мкл	40	---
Мультикалибратор (не входит в состав набора), мкл	---	40
Смешать и инкубировать при 37°С в течение 5 минут. Добавить:
Реагент 2, мкл	200	200
Смешать и инкубировать при 37°С в течение 2 минут. Измерить оптическую плотность 3 раза с интервалом 1 мин. Вычислить среднее изменение оптической плотности за 1 мин (∆Е/мин).

Примечания.
1. Расход реагентов набора на 1 анализ и объем анализируемых образцов зависит от типа используемого прибора и объема кюветы. Объемы реагентов и образца могут быть пропорционально изменены при соблюдении соотношения образец/реагент как 1:25 при монореагентном способе постановки и Реагент 1/образец/Реагент 2 как 20:1:5 при биреагентном способе постановки.
2. Если значение активности КФК-МВ в анализируемой пробе превышает 1000 МЕ/л, анализируемую пробу следует развести физиологическим раствором (0.9% NaCl) и повторить анализ. Полученный результат умножить на фактор разведения.

РАСЧЁТ

По фактору:
Расчёт активности КФК-МВ (Апробы, МЕ/л) для исследуемой пробы провести по формуле:
 

где:  ΔЕ_{пробы/мин} – изменение оптической плотности исследуемой пробы в мин, ед.опт.пл.;
F – фактор для выражения активности в МЕ/л. Точное значение указано в паспорте.

При использовании биохимического анализатора с ненормированной длиной оптического пути фактор следует умножить на коэффициент пересчёта k = 1 / x, где х – длина оптического пути, см, либо провести калибровку по сывороточному мультикалибратору, аттестованному данным методом.

По мультикалибратору (не входит в состав набора):

Расчёт активности КФК-МВ (А_пробы, МЕ/л) для исследуемой пробы провести по формуле:

А_пробы = ( ΔЕ_{пробы/мин} / ΔЕ_МК/мин )х А_МК

где: ΔЕ_{пробы/мин} – изменение оптической плотности исследуемой пробы в мин., ед.опт.пл.;  

ΔЕ_МК/мин – изменение оптической плотности мультикалибратора в мин., ед.опт.пл.;

А_МК – аттестованное значение активности КФК-МВ в мультикалибраторе, МЕ/л.

Для контроля правильности и воспроизводимости результата лабораторного анализа рекомендуется использовать контрольные сыворотки с аттестованным по данному методу показателем.