Санкт-Петербург
8 800 333 73 24БЕСПЛАТНО ПО РОССИИ
Цито-ПАП Окраска по Папаниколау
ДИАХИМ-АЛЬЦИАНОВЫЙ
Производитель «НПФ АБРИС+»
Состав набора: Реагент 1: карболовый фуксин Циля - 1 фл. Реагент 2: солянокислый спирт - 1 фл. Реагент 3: метиленовый синий - 1 фл.
Набор применяется для дифференциальной окраски и выявления принадлежности микроорганизмов к кислотоустойчивым или кислотонеустойчивым путем окраски препаратов, взятых из биологического материала человека (мокрота, смывы с бронхов).
Функциональное назначение – вспомогательное средство в диагностике.
Окрашенные с применением набора стеклопрепараты применяются для бактериологического и микроскопического исследования с целью выявления наличия, либо отсутствия кислотоустойчивых бактерий, вызывающих патологические процессы в дыхательных путях человека, в том числе, для выявления бактерий туберкулеза.
Набор предназначен для обследования всех групп населения любого возраста без градации по демографическому или популяционному признаку.
Набор не имеет противопоказаний к применению.
Область применения - клиническая лабораторная диагностика in vitro.
Исследования проводят в клинико-диагностических лабораториях областных, городских, районных государственных или частных больниц и других ЛПУ, использующих методы клинической лабораторной диагностики.
Принцип метода:
Метод окраски по Циль-Нильсену является наиболее употребляемым и распространенным методом для выявления кислотоустойчивых микроорганизмов. Он основан на использовании нескольких специальных методических приемов:
- окраска фуксином с подогреванием (Реагент 1) - при одновременном воздействии нагревания и сильного протравливающего действия карболовой кислоты повышается способность красителя проникать в микробную клетку и особенно в структуры ее клеточной стенки, состоящей из липидов, миколовых кислот и восков. Обычные анилиновые красители не проникают в клеточную стенку микобактерий и последние не окрашиваются;
- обесцвечивание (Реагент 2) - последующая обработка мазка 25% раствором серной кислоты или 3% раствором солянокислого спирта приводит к обесцвечиванию красителя, проникшего в структуры, не обладающие достаточной гидрофобностью и стойкостью к разрушению в кислоте (кислотоустойчивостью). Только кислото- и спиртоустойчивые микроорганизмы стойко удерживают краситель и остаются после обесцвечивания окрашенными в малиново-красный цвет;
- контрастирующая окраска (Реагент 3) - обесцвеченные элементы мазка докрашивают метиленовым синим для придания контрастности препарату.
Наиболее эффективны способы окраски по Циль-Нильсену для выявления спирто- и кислотоустойчивых бактерий, в частности семейства Mycobacteriaceae (микобактерий туберкулеза, лепры и др.) и некоторых простейших (криптоспоридий).
ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ:
Предметное стекло перед исследованием должно быть тщательно вымыто и обезжирено смесью для обезжиривания предметных стекол.
Приготовление рабочего раствора солянокислого спирта (для кат.№ 441):
Содержимое флакона развести 96° этиловым спиртом в соотношении 1:9 (1 часть солянокислого спирта на 9 частей этилового спирта), перемешать.
Приготовление мазков:
Фиксация мазков:
Для фиксации мазков применяют метиловый спирт, ацетон, смесь Никифорова, жидкость Карнуа. Предметное стекло с высушенным мазком погружают в склянку с фиксирующим веществом на 10—15 минут и затем высушивают на воздухе, либо полученные мазки тщательно высушивают и затем фиксируют сухим жаром. Фиксация достигается посредством несильного нагревания (примерно до 70°С) предметного стекла, которое для этого трижды проводят в верхней трети пламени горелки (спиртовки) мазком вверх в течение 5 сек.
ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА:
Результат окраски:
Кислотоустойчивые микроорганизмы окрашиваются в красный цвет на синем или голубом фоне.
Набор является вспомогательным средством, служащим для окраски препарата. Интерпретация результатов окраски проводится квалифицированным медицинским специалистом на основании выявленных морфологических особенностей в окрашенном препарате в соответствии с применяемыми в КДЛ нормативными актами.
Вопрос: Можно ли разводить краситель по Романовскому 1:5 ?
Авторы: Зенина М.Н. Ассистент кафедры КЛД СЗГМУ им.И.И.Мечникова Черныш Н.Ю. Доцент кафедры лабораторной медицины и генетики НМИЦ им.В.А.Алмазова
Цитологическая лаборатория б-цы Петра Великого Университета Мечникова, г.Санкт-Петербург
Логин
Пароль